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猪源嗜性衣原体HB1043株主要外膜蛋白(MOMP)基因的分析及重组表达

猪源嗜性衣原体HB1043株主要外膜蛋白(MOMP)基因的分析及重组表达

作     者:闫少侠 田永祥 刘泽文 袁芳艳 郭锐 段正赢 杨克礼 孟丽 周丹娜 栗绍文 

作者机构:湖北省农业科学院畜牧兽医研究所武汉430064 华中农业大学动物科学技术学院武汉430070 

基  金:湖北省自然科学基金(2012FFB01404) 动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室开放课题(2011ZD152) 

出 版 物:《湖北农业科学》 (Hubei Agricultural Sciences)

年 卷 期:2013年第52卷第4期

页      码:949-952页

摘      要:根据GenBank中衣原体主要外膜蛋白(MOMP)全基因序列设计特异性引物,以临床分离的衣原体病原中提取的衣原体全基因组为模板,利用特异性引物PCR扩增得到MOMP全基因序列。通过BLAST比对,结果显示其与已提交的猪流产衣原体CG1株的MOMP序列(EU531729)有1个碱基不同。根据对测序结果进行信号肽序列预测及内切酶位点分析,选用BamHⅠ和SalⅠ双酶切将目的蛋白序列克隆到表达载体pET-28a上,得到重组质粒pET-28a-MOMP。将重组质粒转化入*** BL21进行表达,表达产物使用镍离子亲和层析柱进行纯化得到目的蛋白rMOMP。目的蛋白经Western-blot检测,证明其具有免疫学活性。

主 题 词:猪流产嗜性衣原体 主要外膜蛋白(MOMP) 重组表达 

学科分类:09[农学] 

D O I:10.3969/j.issn.0439-8114.2013.04.057

馆 藏 号:203284867...

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