苦瓜ISSR-PCR反应体系的建立与优化

作     者：林珲 汪伟裁 李大忠 薛珠政 李永平 张前荣 康玉妹 温庆放 Lin Hui;Wang Weicai;Li Dazhong;Xue Zhuzheng;Li Yongping;Zhang Qianrong;Kang Yumei;Wen Qingfang

作者机构：福建省农业科学院蔬菜研究中心福州350013 福建省农业科学院作物研究所福州350013 福建省蔬菜工程技术研究中心福州350013 

基　　金：福建省公益类科研院所基本科研专项(2016R1025-2) 国家大宗蔬菜产业体系(CARS-25-G-20)共同资助 

出 版 物：《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)

年 卷 期：2018年第16卷第4期

页      码：1184-1189页

摘      要：为建立适合于苦瓜的ISSR反应体系,为后续苦瓜的遗传多样性分析和亲缘关系鉴定奠定基础,本研究以"609"苦瓜品种作为模板DNA,试验采用单因素试验设计对影响反应体系的DNA模板、引物、d NTP和Taq酶的含量进行优化,并对单因素结果进行L9(33)正交试验设计。研究结果表明,苦瓜ISSR:20μL最佳反应体系为:2μL的10×Buffer(含Mg2+),30 ng模板DNA,0.25 mmol/L的d NTP,0.5μmol/L的引物,1.25 U的Taq DNA聚合酶。在此基础上,对优化引物的退火温度,确定最适宜的退火温度。验证优化的最佳反应体系,选用引物cw39132对48个苦瓜品种进行所确立扩增体系的验证,结果显示扩增产物条带清晰明亮、多态性丰富,且特异性强和重复性好,表明本研究所确定的反应体系适用于苦瓜的ISSR分子标记。

主 题 词：苦瓜 ISSR 分子标记 PCR扩增 

学科分类：09[农学] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 090202[090202] 

核心收录：

D　O　I：10.13271/j.mpb.016.001184

馆 藏 号：203284990...