3-酮基嘌呤还原酶(TSC10)基因表达载体的构建及其在毕赤酵母中的表达

作     者：郑丽娜 刘美辰 王思明 白雪媛 赵雨 赵大庆 王佳雯 ZHENG Li-na;LIU Mei-chen;WANG Si-ming;BAI Xue-yuan;ZHAO Yu;ZHAO Da-qing;WANG Jia-wen

作者机构：长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心长春130117 

基　　金：吉林省中药组学工程实验室建设项目(2014N155)资助 

出 版 物：《科学技术与工程》 (Science Technology and Engineering)

年 卷 期：2018年第18卷第10期

页      码：31-34页

摘      要：TSC10基因所编码的3-酮基嘌呤还原酶是酵母中神经酰胺合成的重要因子。设计了一种从酵母中提取神经酰胺经济、便捷、高效的方法:(1)利用构建含有TSC10基因的毕赤酵母GS115表达载体p PIC3.5K-TSC10;(2)电转化法将该表达质粒转化到GS115感受态细胞中;(3)用G418筛选以及PCR鉴定;(4)使用qRT-PCR和SDS-PAGE进行检测。结果经过G418筛选以及PCR鉴定后确定获得了包含TSC10基因的毕赤酵母转化子,经过qRT-PCR和SDS-PAGE进行检测后发现TSC10基因在20个阳性菌株中均可以稳定、高效表达。成功构建了3-酮基嘌呤还原酶高表达的毕赤酵母菌株,并为后续获得高收率神经酰胺奠定了基础。

主 题 词：3-酮基嘌呤还原酶 毕赤酵母 基因表达 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

馆 藏 号：203285266...