Ⅰ型鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒一步法二重RT-PCR检测方法的建立

作     者：徐丽晶 赵丽丽 刘海燕 王怡平 陈洪岩 XU Li-jing1,2, ZHAO Li-li2, LIU Hai-yan2, WANG Yi-ping2, CHEN Hong-yan1,2

作者机构：东北农业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室黑龙江哈尔滨150069 

基　　金：黑龙江省自然科学基金重点项目(ZD2016006) 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(Y2016PT41) 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(工作编号1610302016013和1610302017013) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2018年第48卷第4期

页      码：456-463页

摘      要：为了建立一种能同时检测I型鸭肝炎病毒（duck hepatitis virustype I，DHV—I）和鸭瘟病毒（duckplague virus，DPV）的检测方法，根据GrenBank中DHV-I和DPV的基因保守序列．设计合成两对特异性引物，扩增得到DHV—I和DPV片段，大小分别为399bp和232bp。据此建立了双重PCR检测方法，并将反应条件进行了优化。结果显示，该方法特异性强，能同时扩增出DHV—I和DPV目的条带，而对其他常见的水禽病病原的扩增结果均为阴性。该方法灵敏度高，最低能检出5．3PgI型鸭肝炎病毒和2．7pg鸭瘟病毒的RNA或DNA。采用该方法对在江苏省徐州地区所采集的166份鸭肛拭子进行检测，DHV—I阳性率为1．2％：DPV阳性率为26％。同时。利用该方法对建立的DHV—I和DPV雏鸭感染模型的肝组织和肝组织接种的鸭胚尿囊液进行检测，结果均为阳性．与常规PCR和RT—PCR检测结果一致。上述结果表明。本研究建立的一步法二重RT—PCR方法可以用于DHV—I和DPV快速准确的诊断。

主 题 词：I型鸭肝炎病毒 鸭瘟病毒 一步法二重RT—PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16656/j.issn.1673=4696.2018.0087

馆 藏 号：203285277...