骨保护素基因修饰的pSecTag2/B载体的构建

作     者：曹寅 梅陵宣 吴迪 赵春晖 CAO Yin;MEI Ling-xuan;WU Di;ZHAO Chun-hui

作者机构：安徽医科大学口腔医学院口腔内科安徽合肥230032 

基　　金：安徽省自然科学基金(03043304) 

出 版 物：《上海口腔医学》 (Shanghai Journal of Stomatology)

年 卷 期：2005年第14卷第3期

页      码：273-276页

摘      要：目的:克隆骨保护素基因(osteoprotegerin,OPG)的cDNA,构建pSecTag2/B-OPG真核分泌表达穿梭载体,为组织工程和基因工程联合治疗牙周病提供物质基础。方法:提取人胚胎肾293细胞的总RNA,设计和合成特异性引物,进行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),扩增出具有抑制破骨细胞功能的OPG基因cDNA,并将其重组到pSecTag2/B载体中,测序鉴定。结果:从293细胞的总RNA中反转录扩增得到编码骨保护素的基因片段,重组到pSecTag2/B载体。经测序证实,此基因与GenBank中[gi:33878056]提供的序列完全一致;重组质粒经PCR、HindIII单酶酶切及EcoRI和BamHI双酶酶切,电泳显示均能切下与预期大小相符的片段。结论:本研究成功构建了pSecTag2/B-OPG分泌表达穿梭载体。

主 题 词：骨保护素 基因 克隆 载体 

学科分类：0831[工学-公安技术类] 1002[医学-临床医学类] 08[工学] 0836[0836] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1006-7248.2005.03.017

馆 藏 号：203285526...