应用CRISPR/Cas9系统编辑水稻SBE3基因获得高抗性淀粉水稻新品系

作     者：白建江 张建明 朴钟泽 方军 李刚燮 王亚 杨瑞芳 Bai Jianjiang 1, Zhang Jianming 1, Piao Zhongze 1, Fang Jun 1 ,Li Gangseob 2, Wang Ya 3, Yang Ruifang1

作者机构：上海市农业科学院作物育种栽培研究所上海201403 韩国农村振兴厅农业技术学院水原市441857 河南省农业科学院粮食作物研究所郑州450002 

基　　金：沪农科种子(2016)第1-3 4号 上海市青年科技启明星计划(B类)(16QB1402500) 农科创2017A05 中韩国际合作项目(PJ013647)共同资助 

出 版 物：《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)

年 卷 期：2018年第16卷第5期

页      码：1510-1516页

摘      要：SBE3是位于水稻第2号染色体上的水稻淀粉分支酶基因,该基因表达量的降低引起水稻抗性淀粉(resistant starch,RS)含量的提高。本研究应用CRISPR/Cas9系统对SBE3基因进行编辑,根据基因编码区序列(CDS)在第8外显子区域设计长度为20 bp的引导序列,化学合成引导序列并构建成sgRNA,将其插入到Cas9质粒骨架载体中,转化农杆菌。通过农杆菌介导的遗传转化方法将构建好的p CAMBIA1300:SBE3sgRNA:Cas9表达载体转入水稻受体材料沪LPR18中。使用PCR扩增转基因阳性植株中含有CRISPR/Cas9靶点的片段并测序验证,确定12个突变单株,其中2个是纯合型,通过后代分离,得到没有潮霉素基因筛选标记的SBE3纯合突变单株,测定其抗性淀粉含量高达10%以上。以上结果表明,本研究已经通过CRIPR/Cas9技术获得稳定的高抗性淀粉水稻纯合突变体材料,为高抗性淀粉育种提供了新的种质资源和创建方法。

主 题 词：水稻 SBE3 CRISPR/Cas9 抗性淀粉 

学科分类：09[农学] 0901[农学-植物生产类] 

核心收录：

D　O　I：10.13271/j.mpb.016.001510

馆 藏 号：203285728...