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Taqman探针荧光PCR法检测食品中的大肠埃希氏菌O145

Taqman探针荧光PCR法检测食品中的大肠埃希氏菌O145

作     者:游淑珠 唐食明 蔡教英 姚丽锋 王小玉 冯家望 丁琦 符家忍 YOU Shu-zhu;TANG Shi-ming;CAI Jiao-ying;YAO Li-feng;WANG Xiao-yu;FENG Jia-wang;DING Qi;FU Jia-ren

作者机构:珠海出入境检验检疫局检验检疫技术中心广东珠海519000 

基  金:国家质检总局科研项目(2010IK174 2013IK191) 

出 版 物:《现代食品科技》 (Modern Food Science and Technology)

年 卷 期:2018年第34卷第3期

页      码:191-195,202页

摘      要:针对大肠埃希氏菌O145的O抗原基因簇的wck D基因的特异性序列设计引物和Taqman探针,建立检测大肠埃希氏菌O145的荧光PCR方法,对其灵敏度、特异性进行验证,并将其用于食品样品的检测。结果表明,本研究中的方法可实现对大肠埃希氏菌O145的特异性扩增,其它27株非O145大肠埃希氏菌和20株非大肠埃希氏菌细菌的菌株均无扩增;检测的灵敏度可达165拷贝/反应;339份食品样品EC肉汤增菌后用本荧光PCR法进行检测,检出大肠埃希氏菌O145阳性31份,阳性率为9.1%。实验结果表明,本研究成功建立了可用于食品中大肠埃希氏菌O145的Taqman探针荧光PCR方法,食品样品采用EC肉汤增菌24 h、热裂解法提取核酸,增菌后检测所需时间由至少3 d^7 d缩短为仅需2 h^3 h,食品检测全过程仅需约28 h,经证实本方法特异性强、操作简便,为食品中大肠埃希氏菌O145提供了一种的快速检测手段。

主 题 词:大肠埃希氏菌 O145血清型 Taqman探针 荧光PCR 食品 检测 

学科分类:081704[081704] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 09[农学] 070302[070302] 0903[农学-动物生产类] 0703[理学-化学类] 

D O I:10.13982/j.mfst.1673-9078.2018.03.028

馆 藏 号:203286582...

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