体外RNA干扰抑制RANKL表达对成骨细胞功能的影响

作     者：高延征 高坤 于正红 司文腾 GAO Yan-zheng;GAO Kun;YU Zheng-hong;SI Wen-teng

作者机构：河南省人民医院骨科河南郑州450003 河南省中医学院第二附属医院骨科河南郑州450002 

出 版 物：《河南医学研究》 (Henan Medical Research)

年 卷 期：2009年第18卷第1期

页      码：1-5页

摘      要：目的:观察用RNA干扰的方法抑制大鼠成骨细胞核激活因子受体配体(Ligand of receptor activator ofNF-κB,RANKL)mRNA表达后,成骨细胞RANKL、OPG蛋白表达和I型胶原表达、细胞增殖能力的时间变化规律。方法:设计4条RANKL序列特异性小干扰RNA(siRNA),用Lipofectamin2000转染成骨细胞,采用荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)检测RANKL的表达,筛选出最有效的干扰序列,并用Western blot检测转染后1、2、3、5、7天RANKL、OPG蛋白的表达,同时观察成骨I型胶原表达、细胞增殖能力在相同时间点的变化。结果:对siRNA中有一对可使大鼠成骨细胞的RANKLmRNA水平下降89%。用最佳siRNA转染后1、2、3、5、7天,与空白对照组相比,RANKL蛋白表达率分别为59.1%、39.5%、26.6%、40.0%、57.3%(P0.05)。成骨细胞的I型胶原表达、增殖能力在相同时间点较空白对照组降低,差异也不具有显著性(P>0.05)。结论:靶向siRNA可显著下调成骨细胞RANKL表达,同时对OPG表达及成骨细胞的主要功能无显著影响。

主 题 词：核激活因子受体配体 RNA干扰 大鼠 成骨细胞 基因沉默 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1004-437X.2009.01.001

馆 藏 号：203286873...