家蚕翅原基发育关联基因BmHMGS的鉴定与表达特征分析

作     者：蒋诗梦 钟杨生 林碧敏 陈芳艳 严会超 林健荣 Jiang Shimeng;Zhong Yangsheng;Lin Bimin;Chen Fangyan;Yan Huichao;Lin Jianrong

作者机构：华南农业大学动物科学学院广州510642 湖南省蚕桑科学研究所长沙410127 

基　　金：国家自然科学基金项目(No.31272368) 现代农业产业技术体系建设专项(No.CARS-22) 公益性行业(农业)科研专项(No.201403064) 

出 版 物：《蚕业科学》 (ACTA SERICOLOGICA SINICA)

年 卷 期：2018年第44卷第2期

页      码：242-248页

摘      要：家蚕幼虫的翅原基最终发育为成虫的翅,翅原基发育与家蚕的变态发育紧密关联。为了研究激素作用下家蚕翅原基发育的分子调控机制,以经过蜕皮激素20E体外诱导培养和未经诱导培养的家蚕5龄幼虫翅原基为材料分别提取总蛋白质,利用Shotgun质谱分析在20E诱导组的翅原基中获得132种差异蛋白,在未经20E诱导组的翅原基中获得76种差异蛋白。进一步通过生物信息学技术及GO分类法在20E诱导组的翅原基的差异蛋白中,筛选到1个具有生物调节作用的酶类蛋白基因Bm HMGS作为翅原基发育相关的候选基因,设计引物并以上蔟1 d的蚕体翅原基总RNA反转录得到的c DNA为模板,克隆了该基因。通过qRT-PCR检测到Bm HMGS基因在幼虫5龄1 d、上蔟3 d、蛹期1 d蚕体内的表达量较高,其中在上蔟3 d的表达量达到峰值。构建重组载体进行Bm HMGS的原核表达并制备抗体后,采用Western blot技术在5龄1～7 d和上蔟1～3 d的蚕体翅原基、脂肪体中及上蔟1～3 d的生殖腺中都可以检测到Bm HMGS的表达,并且在翅原基中的表达没有发育时期特异性。研究结果表明,从20E诱导组的家蚕翅原基中鉴定的Bm HMGS与翅原基发育相关,其表达在5龄至上蔟阶段没有时期和组织的特异性,推测Bm HMGS是一个具有多种生物学功能的基因。

主 题 词：家蚕翅原基 体外培养 蜕皮激素 Shotgun质谱 BmHMGS基因 表达特征 

学科分类：090504[090504] 0710[理学-生物科学类] 07[理学] 0905[农学-林学类] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.13441/j.cnki.cykx.2018.02.008

馆 藏 号：203287382...