NT-3-HUMSCs联合基因沉默SOCS3治疗SD大鼠脊髓损伤后的神经再生修复

作     者：白刚 张洪钿 赖军 罗林 左频 范耀东 BAI Gang;ZHANG Hong-tian;LAI Jun;LUO Lin;ZUO Pin;FAN Yao-dong

作者机构：昆明医科大学第三附属医院神经外科云南昆明650118 中国人民解放军陆军总医院神经外科北京100700 重庆市人民医院神经外科重庆400013 

基　　金：云南省教育厅科学研究基金重点资助项目(2014Z054) 

出 版 物：《昆明医科大学学报》 (Journal of Kunming Medical University)

年 卷 期：2018年第39卷第3期

页      码：31-37页

摘      要：目的 NT-3-HUMSCs联合基因沉默SOCS3治疗SD大鼠脊髓损伤,以期促进损伤神经再生修复.方法 (1)用贴壁法体外培养人脐带间充质细胞(HUMSC),同时进行分离,提纯和鉴定;(2)构建NT-3基因真核表达载体,利用基因转染技术将其转入HUMSC,构建NT-3-HUMSC细胞,体外检测其存活情况及NT-3表达情况;(3)筛选作用于SOCS3的特异性靶点,进行序列同源性分析,设立阴性对照,设计并合成SOCS3-siRNA,同时在体外检测功能;(4)建立SD大鼠脊髓损伤模型分为为:I.假手术组10只;Ⅱ.T12全脊髓横断损伤模型40只,随机分为4组,生理盐水治疗组10只;siRNA+NT-3-HUMSCs治疗组10只;NT-3-HUMSCs治疗组10只;SOCS3-siRNA治疗组10只.以上各组造模成功后,分别存活12周进行神经电生理监测;(5)对SD大鼠进行灌注固定和取材,观察局部胶质疤痕降解情况和轴突再生情况,同时运用生物素化葡聚糖(BDA)荧光顺行追踪取损伤移植区-宿主交界处头尾侧脊髓组织,镜下观察皮质脊髓束再生的情况.结果(1)siRNA+NT-3-HUMSCs治疗组较生理盐水治疗组横断脊髓空洞明显缩小,差异有统计学意义(P<0.05);(2)BDA顺行追踪结果表明siRNA+NT-3-HUMSCs治疗组较生理盐水治疗组神经轴突生长明显;(3)神经电生理检测损伤12周后治疗组P40潜伏期较假手术组缩短,siRNA+NT-3-HUMSCs治疗组较生理盐水治疗组比较潜伏期缩短明显,波幅升高明显,差异有统计学意义(P<0.05).结论 NT-3-HUMSCs联合基因沉默SOCS3治疗SD大鼠脊髓损伤,可以促进损伤神经再生修复.

主 题 词：脊髓损伤 SOCS3 siRNA NT-3基因 基因转染 

学科分类：10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1003-4706.2018.03.006

馆 藏 号：203287498...