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多倍体枇杷SCoT分析体系的建立与优化

多倍体枇杷SCoT分析体系的建立与优化

作     者:韩国辉 汪卫星 向素琼 边禹 郭启高 何桥 李晓林 梁国鲁 

作者机构:南方山地园艺学教育部重点实验室/西南大学园艺园林学院重庆400715 

基  金:国家自然科学基金(30971986) 重庆市科委重点攻关项目(CSTC2009AB1183) 重庆市科委自然基金项目(CSTC2008BB1122) 

出 版 物:《果树学报》 (Journal of Fruit Science)

年 卷 期:2011年第28卷第3期

页      码:433-437页

摘      要:以软条白沙枇杷三倍体株系为试材,采用L25(56)正交设计方法,对影响枇杷SCoT-PCR反应的Mg2+、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶及模板DNA用量等因素进行优化筛选,并对最适退火温度进行了探讨。建立了适于不同倍性枇杷分析的SCoT-PCR扩增体系,即20μL的优化体系中含有:Mg2+1.5 mmol·L-1,dNTPs 0.35 mmol·L-1,引物0.5μmol·L-1,Taq酶0.5 U,模板DNA 50 ng。引物最适退火温度为51.8℃。应用优化的反应体系,对32个SCoT引物和3个枇杷品种(泸州六号:2x,3x,4x,5x;龙泉1号:2x,3x,4x;早红3号:2x,3x,4x)的10个不同倍性株系进行扩增,获得了条带清晰,稳定可靠的电泳结果。

主 题 词:枇杷 多倍体 目标起始密码子多态性 正交优化 

学科分类:09[农学] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 090201[090201] 

D O I:10.13925/j.cnki.gsxb.2011.03.017

馆 藏 号:203287686...

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