猪圆环病毒2型特异性荧光定量PCR检测方法的建立与应用

作     者：吴晓燕 刘涛 李俊 时建立 韩偲 刘洋 吴家强 周顺 王金宝 WU Xiao-yan;LIU Tao;LI Jun;SHI Jian-li;HAN Si;LIU Yang;WU Jia-qiang;ZHOU Shun;WANG Jin-bao

作者机构：青岛农业大学动物科技学院山东青岛266109 山东省农业科学院山东济南250100 山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室山东济南250100 

基　　金：兽医生物技术国家重点实验室开放基金课题(SKLVBF201007) 山东省自然科学基金资助项目(ZR2010CQ003) 

出 版 物：《家畜生态学报》 (Journal of Domestic Animal Ecology)

年 卷 期：2011年第32卷第2期

页      码：41-46页

摘      要：研究旨在建立基于SYBR Green I荧光定量PCR检测PCV 2的技术方法。根据GenBank中的猪圆环病毒2型(PCV 2)的基因序列(HQ148879),设计一对特异性引物,利用普通PCR技术扩增出PCV 2的ORF2基因702bp片段,并克隆到pVAX1载体,以纯化的质粒作为PCR检测的标准模板,以10倍梯度稀释质粒为阳性标准品,摸索荧光定量PCR试验,并绘制标准曲线,以此建立一种荧光定量PCR特异性检测猪圆环病毒的方法。结果表明,该方法对PCV 2有很好的特异性,其敏感性比常规PCR高100倍,批间与批内重复试验变异系数均小于2.5%。经临床应用表明荧光定量PCR方法的建立实现了对PCV 2特异性的快速诊断和定量检测。

主 题 词：猪圆环病毒2型 SYBR Green I 荧光定量PCR 特异性 

学科分类：07[理学] 0713[0713] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-1182.2011.02.010

馆 藏 号：203287696...