斯氏艾美耳球虫ASP基因的克隆表达与免疫特性分析

作     者：宋鸿雁 景瑾 董蓉莲 仇保丰 蒋荧梅 朱顺星 王生存 邵义祥 SONG Hong-yan;JING Jin;DONG Rong-lian;QIU Bao-feng;JIANG Ying-mei;ZHU Shun-xing;WANG Sheng-cun;SHAO Yi-xiang

作者机构：南通大学实验动物中心江苏南通226001 江苏省疾病预防控制中心江苏南京210009 南通出入境检验检疫局江苏南通226004 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(31301926) 江苏省自然科学基金资助项目(BK20130388) 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2018年第38卷第4期

页      码：676-681页

摘      要：根据免疫蛋白组学研究的质谱结果获得的部分氨基酸序列和已发布近源物种天冬氨酸蛋白酶（ASP）蛋白序列设计引物，通过cDNA末端快速扩增法（RACE）获得斯氏艾美耳球虫（***）ASP的全基因序列，将其连入原核表达裁体pET-28a（＋），转化CompetentRosetta2（DE3）pLysS，通过IPTG诱导表达重组ASP蛋白，并进行Westernblot分析。结果显示，ASP序列全长为1568bp，最大ORF为1407bp。Westernblot分析发现，ASP在诱导后37℃培养4h条件下有表达，但全部为不溶性表达；在诱导后20℃过夜培养条件下有表达，且有少量可溶性表达；证实重组ASP蛋白确实对***有免疫原性。结果表明，试验成功获得***的全基因序列以及重组ASP蛋白．

主 题 词：E.stiedai ASP cDNA末端快速扩增法 克隆 原核表达 重组蛋白 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16303/j.cnki.1005-4545.2018.04.12

馆 藏 号：203287776...