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绵羊肺炎支原体TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

绵羊肺炎支原体TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

作     者:林裕胜 江锦秀 张靖鹏 游伟 胡奇林 LIN Yu-sheng;JIANG Jin-xiu;ZHANG Jing-peng;YOU Wei;HU Qi-lin

作者机构:福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建福州350013 

基  金:国家重点研发计划项目(2016YFD0500906) 福建省科技创新平台建设项目(2014N2003-5) 福建省农业科学院科技创新项目(PC2017-9) 福建省农业科学院科技创新团队PI项目(2016PI-7) 

出 版 物:《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期:2018年第40卷第4期

页      码:316-320页

摘      要:为建立一种快速检测绵羊肺炎支原体(Mo)的检测方法,本研究根据GenBank登录的Mo Y-98株(KR021380.1)黏附素基因p113基因序列设计1对特异性引物和探针,建立了针对Mo的TaqMan荧光定量检测方法。结果显示,该方法可以特异性检测Mo,对丝状支原体山羊亚种、山羊支原体山羊肺炎亚种、莱氏无胆甾原体及羊传染性脓疱病毒(ORFV)等羊常见病原扩增结果均为阴性;该方法最低检测限为10拷贝/μL;组内和组间变异系数均小于2%;采用该方法对96份临床样品进行检测,结果 Mo的阳性率为67.7%(65/96),比常规PCR法及支原体分离鉴定法更加敏感。以上结果表明本研究建立的Mo TaqMan荧光定量PCR方法可以用于Mo的准确快速检测及羊支原体性肺炎的诊断和流行病学调查。

主 题 词:绵羊肺炎支原体 TaqMan探针 RF-PCR 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.1008-0589.201707007

馆 藏 号:203287978...

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