应用RNAi技术沉默survivin基因对肝癌细胞系BEL-7404生长的影响

作     者：廖艳 袁晟光 廖维甲 覃理灵 梅铭惠 陈谦 

作者机构：桂林市疾病预防控制中心广西桂林541001 桂林医学院附属医院肝胆外科研究室 

基　　金：国家自然科学基金项目(30360116) 广西科学研究与技术开发计划项目(桂科攻0428005-7) 广西壮族自治区教育厅面上项目(200911MS163) 广西壮族自治区卫生厅计划课题(Z2009030) 

出 版 物：《中国实验诊断学》 (Chinese Journal of Laboratory Diagnosis)

年 卷 期：2011年第15卷第12期

页      码：1991-1994页

摘      要：目的为研究生存素survivin基因的功能及肝细胞癌(HCC)的基因治疗策略。构建针对survivin基因的siR-NA的表达载体,转染肝癌细胞系BEL-7404后评价其对survivin基因表达的抑制作用。方法依据survivin基因设计siRNA片断,构建pGenesil-1/survivin表达载体,脂质体LipofectamineTM 2000转染BEL-7404细胞。实时定量聚合酶链反应从基因转录水平检测survivin基因的表达率,应用免疫组织化学的方法检测肝癌细胞系BEL-7404中survivin蛋白表达抑制情况。结果本实验已成功构建了针对survivin基因的pGenesil-1/survivin质粒。实时定量PCR检测显示,BEL-7404细胞经特异性siRNA作用后survivin基因的表达受抑制,其Ct值由34.2降低到22.8,免疫组织化学结果显示,pGenesil-1/survivin介导的siRNA能抑制BEL-7404细胞中survivin蛋白的表达。结论构建的siRNA能特异地抑制sur-vivin靶基因在肝癌细胞株BEL-7404中的表达,为肿瘤的生物学治疗提供了新的方法和材料。

主 题 词：RNA干扰 生存素 BEL-7404细胞 基因表达 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-4287.2011.12.001

馆 藏 号：203288109...