小反刍兽疫病毒M基因的截短表达及多抗血清的制备

作     者：梅跃辉 俞赵荣 杨侃侃 王元红 张谦 张高峰 蒋书东 王勇 李永东 MEI Yuehui;YU Zhaorong;YANG Kankan;WANG Yuanhong;ZHANG Qian;ZHANG Gaofeng;JIANG Shudong;WANG Yong;LI Yongdong

作者机构：安徽农业大学动物科技学院安徽合肥230036 宁波市疾病预防控制中心浙江宁波315010 

基　　金：安徽省自然科学基金(1508085QC60) 国家自然科学基金(31602063) 2017年安徽农业大学大学生创新基金 

出 版 物：《中国微生态学杂志》 (Chinese Journal of Microecology)

年 卷 期：2018年第30卷第5期

页      码：502-505,510页

摘      要：目的截短表达小反刍兽疫病毒M蛋白基因并将其用于多抗血清的制备。方法之前有研究未能表达完整的M蛋白,而若在抗原性较弱的区域将其一分为二,以截短的形式进行表达,却能达到较理想的水平。因此根据GenBank上公布的PPRV M基因的序列,设计1对特异性引物,扩增出480bp的目的基因,将其克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,得到重组表达质粒pET-32a-PPRV-M1,后转化至Rosetta感受态细胞中,IPTG诱导表达后,通过SDS-PAGE和Western blot试验对重组蛋白进行鉴定,将纯化后的重组蛋白免疫6周龄BALB/c雌鼠,制备多克隆抗体血清。结果经SDS-PAGE及Western blot鉴定,证明截短的M基因的蛋白主要以包涵体形式高效表达并具有良好的反应原性。结论成功克隆表达了截短的小反刍兽疫病毒M基因的蛋白并制备了多抗血清,为建立血清学相关的检测方法及临床治疗奠定了基础。

主 题 词：小反刍兽疫病毒 M基因 原核表达 多抗血清 

学科分类：0905[农学-林学类] 09[农学] 

D　O　I：10.13381/j.cnki.cjm.201805002

馆 藏 号：203288897...