太子参BBWV2和TuMV的巢式RT-PCR检测

作     者：匡云波 侯令 方晓勤 王佳璐 杨燕君 叶祖云 KUANGYun-bo;HOU Ling;FANGXiao-qin;WANG Jia-lu;YANG Yan-jun;YE Zu-yun

作者机构：宁德师范学院生命科学学院福建宁德352100 福建省特色药用植物工程技术研究中心福建宁德352100 

基　　金：福建省自然科学基金项目(2017J05058) 福建省教育厅科技扶贫产学研专项(JZ160394) 国家中药标准化项目(ZYBZH-Y-FJ-08) 

出 版 物：《福建农业学报》 (Fujian Journal of Agricultural Sciences)

年 卷 期：2018年第33卷第3期

页      码：288-292页

摘      要：为探求快速、灵敏的太子参脱毒检测技术,建立太子参蚕豆萎蔫病毒2(Broad bean wilt virus 2,BBWV2)和芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)的巢式RT-PCR快速检测方法,根据GenBank数据库中这2种病毒外壳蛋白(coat protein,cp)基因核苷酸序列的保守区域分别设计2对简并引物,建立和优化巢式RT-PCR扩增体系,继而进行常规RT-PCR和巢式RT-PCR灵敏度的比较,并应用巢式RT-PCR对7份田间栽培太子参病样和4份脱毒苗样品进行检测。结果显示:BBWV2、TuMV的巢式引物最佳退火温度分别为60、62℃;采用巢式RT-PCR,这两种病毒样品cDNA原液在稀释10~5倍后仍能扩增出特异性条带,比常规RT-PCR的灵敏度至少高10倍。本研究建立的巢式RT-PCR检测方法可快速、稳定、准确地检测BBWV2和TuMV,且具有更高的灵敏度,更能满足太子参脱毒检测的需要。

主 题 词：太子参 太子参蚕豆萎蔫病毒2(BBWV2) 芜菁花叶病毒(TuMV) 巢式RT-PCR 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 

D　O　I：10.19303/j.issn.1008-0384.2018.03.013

馆 藏 号：203288956...