环介导等温扩增技术在弓形虫感染小鼠腹腔液检测中的应用

作     者：郭俊杰 许妹珍 林颖悦 邓宏瑜 赵艳玲 GUO Jun -fie

作者机构：齐齐哈尔医学院医学技术学院161006 齐齐哈尔医学院 

基　　金：齐齐哈尔市科学技术计划项目(SFZD-2012107) 

出 版 物：《齐齐哈尔医学院学报》 (Journal of Qiqihar Medical University)

年 卷 期：2018年第39卷第3期

页      码：303-305页

摘      要：目的环介导等温扩增(LAMP)检测弓形虫感染小鼠腹腔液的反应条件及反应体系的优化与筛选。方法建立弓形虫感染小鼠模型,酚氯仿法抽提小鼠腹腔液DNA作为反应模板,在弓形虫大小为529 bp的高度重复序列中选择一段靶序列设计内外引物,建立LAMP反应并对反应体系及条件中Mg^(2+)、甜菜碱及反应温度条件进行优化。结果所建立的LAMP反应以Mg^(2+)浓度和反应温度影响较为明显,而甜菜碱浓度变化的影响不大,优化后的LAMP反应体系能够特异性扩增弓形虫感染小鼠的腹水微量DNA,且对日本血吸虫、肝吸虫及盾盘吸虫的DNA的扩增显示为阴性。结论以弓形虫529 bp建立并优化后的LAMP技术可以检测到弓形虫微量DNA,并且具有较好的特异性,可对人体弓形虫轻度感染诊断技术的建立提供一定的科学依据。

主 题 词：弓形虫 腹水 LAMP 核酸检测 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1002-1256.2018.03.023

馆 藏 号：203288976...