鸭肠炎病毒强毒和疫苗弱毒鉴别诊断PCR方法的建立

作     者：万春和 刘荣昌 陈翠腾 程龙飞 傅光华 施少华 陈红梅 傅秋玲 黄瑜 WAN Chun-he;LIU Rong-chang;CHEN Cui-teng;CHENG Long-fei;FU Guang-hua;SHI Shao-hua;CHEN Hong-mei;FU Qiu-ling;HUANG Yu

作者机构：福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心/福建省禽病防治重点实验室福建福州350013 

基　　金：国家水禽产业技术体系建设专项(CARS-42) 国家自然科学基金项目(31602068) 福建省财政专项--福建省农业科学院青年科技创新团队建设项目(STIT2017-3-10) 福建省农业科学院青年科技英才项目(YC2015-12) 福建省科技计划项目--省属公益类科研院所基本科研专项(2018R1023-5 2017R1023-7) 

出 版 物：《福建农业学报》 (Fujian Journal of Agricultural Sciences)

年 卷 期：2018年第33卷第3期

页      码：219-224页

摘      要：为建立鸭肠炎病毒(duck enteritis virus,DEV)强毒和疫苗弱毒的鉴别诊断方法,通过分析比较GenBank数据库中上传的DEV强毒株和疫苗弱毒株UL2基因核苷酸序列,分析DEV疫苗弱毒和DEV强毒在UL2基因上的核苷酸序列,利用引物设计软件Oligo 7.0,设计一组可对DEV强毒株和疫苗弱毒株UL2基因进行编码区全长扩增的特异性引物,经条件优化后建立DEV强毒和疫苗弱毒鉴别诊断的PCR方法。结果表明,DEV疫苗弱毒和DEV强毒在UL2基因上存在528bp的连续核苷酸序列缺失。优化后的PCR方法最佳退火温度为55℃,对DEV强毒和疫苗弱毒扩增片段大小分别为1 019bp和491bp;敏感性强,最低检测限为15.3pg;特异性好,对鸭源常见传染病(如番鸭细小病毒、鸭圆环病毒、鹅细小病毒、鸭源大肠杆菌、鸭疫里默氏杆菌和鸭源禽多杀性巴氏杆菌)均无特异性扩增。

主 题 词：鸭肠炎病毒 强毒 疫苗弱毒 UL2基因 PCR 鉴别诊断 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.19303/j.issn.1008-0384.2018.03.001

馆 藏 号：203289029...