鸭1型甲肝病毒亚型VP3基因的克隆与原核表达

作     者：黄剑梅 傅秋玲 傅光华 万春和 陈翠腾 陈珍 程龙飞 施少华 陈红梅 黄瑜 HUANG Jian-mei;FU Qiu-ling;FU Guang-hua;WAN Chun-he;CHEN Cui-teng;CHEN Zhen;CHENG Long-fei;SHI Shao-hua;CHEN Hong-mei;HUANG Yu

作者机构：江西农业大学动物科学技术学院江西南昌330045 福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建福州350013 

基　　金：国家自然科学基金项目(31472222) 福建省科技计划项目--省属公益类科研院所基本科研专项(2014R1023-3) 现代农业产业技术体系建设专项(CARS-43) 福建省自然科学基金项目(2015J01113) 新世纪"百千万人才工程"国家级人选科研补助资金(NCNCMTPC-2009) 

出 版 物：《福建农业学报》 (Fujian Journal of Agricultural Sciences)

年 卷 期：2015年第30卷第5期

页      码：425-429页

摘      要：参照鸭1型甲肝病毒亚型(DHAV-1a)的基因组序列设计了1对VP3基因特异性扩增引物,通过RT-PCR方法扩增获得了DHAV-1a结构蛋白VP3基因,将纯化的VP3基因与pEASYTM-Blunt Zero Cloning Vector连接,构建DHAV-1aVP3基因克隆重组质粒,然后将VP3基因片段插入pET-32a(+)表达载体,转化*** BL21(DE3)感受态细胞。以1.0mmol·L-1 IPTG于37℃诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot分析表明VP3基因于大肠杆菌中成功表达,其分子量为47kDa,且表达的VP3蛋白能够与Anti-His Mouse mAb发生特异性反应,具有良好的生物活性,为进一步研究DHAV-1aVP3蛋白功能和以VP3蛋白为抗原研制DHAV-1a诊断试剂盒奠定基础。

主 题 词：鸭1型甲肝病毒亚型 VP3基因 克隆 原核表达 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0384.2015.05.001

馆 藏 号：203289743...