葡糖杆菌的SYBR Green Ι荧光定量PCR方法的建立

作     者：李月华 周巍 杨岚 章晶晶 王爽 刘涛 张岩 张伟 

作者机构：河北农业大学食品科技学院河北保定071000 河北省食品检验研究院河北省食品安全重点实验室河北石家庄050091 

基　　金：河北省食药局科技计划项目(PT2014030) 

出 版 物：《现代食品科技》 (Modern Food Science and Technology)

年 卷 期：2015年第31卷第4期

页      码：272-276 241,241页

摘      要：基于Gen Bank提供的葡糖杆菌的16S r RNA保守序列设计PCR引物,利用SYBR GreenΙ荧光定量PCR技术建立一种快速灵敏检测酸乳制品中葡糖杆菌的方法。用本研究建立的SYBR GreenΙ荧光PCR方法对3株葡糖杆菌以及18株非葡糖杆菌进行特异性检测,并用凝胶电泳验证其可靠性,结果显示,本研究所设计的引物具有良好的特异性。对扩增结束后的PCR产物进行溶解曲线分析,证实此引物的扩增产物存在引物二聚体,但可通过溶解曲线的出峰时间排除非特异性扩增。利用SYBR GreenΙ荧光定量PCR检测葡糖杆菌建立的标准曲线相关性良好,R2=0.9968,对葡糖杆菌进行灵敏度检测,最低检出限可达75 CFU/m L。利用该方法可成功检测出5份人工污染样品中的葡糖杆菌,研究表明,该方法灵敏度高、操作简便快捷,适用于酸乳制品的定量检测。

主 题 词：葡糖杆菌 SYBR GreenΙ 实时定量pcr 检测 酸乳 

学科分类：09[农学] 0903[农学-动物生产类] 

核心收录：

D　O　I：10.13982/j.mfst.1673-9078.2015.4.044

馆 藏 号：203290258...