连接酶反应检测乙型肝炎病毒阿德福韦耐药突变的初步研究

作     者：王永忠 吴国祥 濮翔科 陈敏 肖君华 杨志军 WANG Yongzhong;WU Guoxiang;Pu Xiangke;CHEN Min;XIAO Junhua;YANG Zhijun

作者机构：江苏常州市第三人民医院检验科江苏常州213001 东华大学生物科学与技术研究所上海201620 上海复星医学科技发展有限公司上海200233 

出 版 物：《检验医学》 (Laboratory Medicine)

年 卷 期：2009年第24卷第9期

页      码：651-654页

摘      要：目的建立一种基于连接酶检测反应(LDR)技术的方法,检测慢性乙型肝炎患者阿德福韦(ADV)耐药突变rtA181V/T和rtN236T。方法设计特异性引物和针对不同突变类型的探针,聚合酶链反应(PCR)扩增后进行LDR,最后在测序仪上分析结果。以直接测序法作为对照分析55例临床标本,对结果不一致的标本进行亚克隆测序确认。结果LDR能够在野生型质粒背景下检测到1%的rtA181V/T或rtN236T突变质粒,不与野生型质粒及血清常见病毒产生交叉扩增。55例临床标本中检测到8例(14.5%)rtA181V/T和rtN236T双突变,6例(10.9%)rtA181V/T单突变,7例(12.7%)rtN236T单突变,与直接测序法结果一致的标本有52例(94.5%)。对3例结果不一致的标本进行亚克隆测序分析,结果与LDR一致。结论LDR是一种特异、敏感的方法,可以用于监测慢性乙型肝炎患者ADV耐药突变。

主 题 词：连接酶检测反应 乙型肝炎病毒 阿德福韦 耐药 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-8640.2009.09.006

馆 藏 号：203295630...