新型靶向性非病毒载体K16GRGDSPC转染骨髓基质细胞的条件优化

作     者：潘海涛 郑启新 郭晓东 刘勇 李长文 宋玉林 Pan Haitao,Zheng Qixin,Guo Xiaodong et alDepartment of Orthopedics,Union Hospital,Tongji Medical College,Huazhong University of Science and Technology,Wuhan 430022

作者机构：华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科武汉430022 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.30200063 No.3047083) 

出 版 物：《华中科技大学学报（医学版）》 (Acta Medicinae Universitatis Scientiae et Technologiae Huazhong)

年 卷 期：2006年第35卷第3期

页      码：369-372,376页

摘      要：目的 优化新型靶向性非病毒基因载体——含RGD肽K16GRGDSPC介导转化生长因子β1（TGF-β1）基因转染骨髓基质细胞的转染条件。方法 固相合成法合成K16GRGDSPC寡肽并用质谱仪和高压液相色谱仪进行检测。在保持其它因素一致的条件下，通过变化单一因子来筛选某个最佳参数。结果 合成肽与设计肽的分子量一致，纯度为94％～95％，满足实验要求。在寡肽载体介导转染的过程中，溶酶体抑制剂氯喹起着不可或缺的作用，而且在氯喹溶液中的暴露时间至少应维持在8h以上；在载体／DNA复合物中暴露时间过短（〈4h）或过长（〉24h）对转染都有不利影响；血清对载体／DNA复合物与细胞的结合有明显抑制作用；质粒含量在2～4μg时转染效果最佳；质粒／载体质量比为1：2～1：4时有较高的转染效率；加入转铁蛋白也能显著提高基因的转染和表达，且在25μg时转染效率达到最大。结论 通过优化转染条件可提高寡肽载体的转染效率，可为下一步进行骨基质材料表面基因修饰研究提供基础。

主 题 词：靶向性非病毒载体 含RGD肽 转染 优化 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3870/j.issn.1672-0741.2006.03.025

馆 藏 号：203295883...