猪链球菌Ide通用截短蛋白原核表达及纯化研究

作     者：曲光刚 王长江 李书光 李茂峰 武曰星 金婷婷 韩文瑜 沈志强 QU Guang-gang;WANG Chang-jiang;LI Shu-guang;LI Mao-feng;WU Yue-xing;JIN Ting-ting;HAN Wen-yu;SHEN Zhi-qiang

作者机构：山东省滨州畜牧兽医研究院博士后科研工作站山东滨州256600 吉林大学博士后科研流动站长春130062 山东绿都生物科技有限公司山东滨州256600 山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600 阳信县综合检验检测中心山东滨州251800 

出 版 物：《中国兽药杂志》 (Chinese Journal of Veterinary Drug)

年 卷 期：2018年第52卷第6期

页      码：7-12页

摘      要：为利用大肠埃希菌表达猪链球菌Ide通用截短蛋白,通过对Gen Bank公布的Ide S蛋白家族基因同源性分析,使用Primer 5.0软件设计一对特异性引物,以猪链球菌2型强毒株JZLQ全基因组为模板,采用PCR方法扩增Ide基因截短片段,经Bam HⅠ和HindⅢ双酶切后将目的片段分别克隆到p ET28a、p ET32a和p ET-sumo表达载体上,分别转化宿主菌*** BL21(DE3)。通过优化诱导温度及诱导剂IPTG浓度进行表达并对表达产物进行SDS-PAGE分析。结果显示,PCR扩增片段大小约为1200 bp,经双酶切和测序验证构建正确;三种重组表达载体转化大肠埃希菌后均有目的蛋白表达,但不同表达条件下目的蛋白表达量存在差异,其中p ET28a-Tr Ide重组表达载体用25℃诱导、IPTG终浓度为1 mmol/L时可实现重组蛋白的高效可溶性表达,为IdeSsuis蛋白在猪链球菌通用疫苗研发方面的研究奠定了基础。

主 题 词：猪链球菌2型 IgM裂解酶 原核表达 SDS-PAGE分析 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.11751/ISSN.1002-1280.2018.06.02

馆 藏 号：203296153...