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牛副流感病毒3型RT-PCR方法的建立及初步应用

牛副流感病毒3型RT-PCR方法的建立及初步应用

作     者:王吉 付瑞 李晓波 王淑菁 王莎莎 李威 秦骁 巩薇 岳秉飞 贺争鸣 WANG Ji, FU Rui, LI Xiao-bo, WANG Shu-jing, WANG Sha-sha, LI Wei, QIN Xiao, GONG Wei, YUE Bing-fei, HE Zheng-ming

作者机构:中国食品药品检定研究院国家实验动物微生物遗传检测中心北京100050 

基  金:中国食品药品检定研究院学科带头人培养基金项目(2015X5) 

出 版 物:《实验动物与比较医学》 (Laboratory Animal and Comparative Medicine)

年 卷 期:2018年第38卷第2期

页      码:98-104页

摘      要:目的建立用于牛源性样本中牛副流感病毒3型(BPIV3)RT-PCR检测方法。方法选择已发表的BPIV3神经氨酸酶(HN)基因高度保守区域作为靶基因,设计合成引物,建立BPIV3 RT-PCR方法。并对方法的特异性、敏感性、重复性、稳定性等进行方法学评价。同时用建立的RT-PCR方法检测137份牛源性样本。结果建立的BPIV3RT-PCR方法与牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛鼻气管炎病毒(BHV-1)、仙台病毒(SV)均无交叉反应;可检测病毒最小滴度为6 lgTCID_(50)/mL;BPIV3cDNA在-30℃冰箱放置12个月仍可检测出目的条带;应用建立的方法检测137份牛源样本,核酸阳性率为14.6%。结论建立的BPIV3荧光定量PCR检测方法具有快速、特异、敏感及稳定的特点,可用于牛源性样本中BPIV3核酸的检测。

主 题 词:牛副流感病毒3型(BPIV3) PCR 牛源性样本 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 07[理学] 100103[100103] 071002[071002] 10[医学] 

D O I:10.3969/j.issn.1674-5817.2018.02.004

馆 藏 号:203296291...

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