猪圆环病毒3型LAMP检测方法的建立与应用

作     者：姜辰龙 严秀文 张日腾 李勇 姜平 白娟 JIANG Chen-long;YAN Xiu-wen;ZHANG Ri-teng;LI Yong;JIANG Ping;BAI Juan

作者机构：南京农业大学生命科学学院南京210095 南京农业大学动物医学院农业部动物细菌学重点实验室南京210095 

基　　金：国家自然科学基金(31672565 31502082) 中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(KJQN201616) 国家生猪现代产业体系建设专项(CARS-36) 

出 版 物：《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期：2018年第49卷第6期

页      码：1314-1319页

摘      要：为快速诊断和检测猪圆环病毒3型(PCV3),本研究根据其ORF2基因保守序列,设计特异性引物,并通过Bst DNA聚合酶、引物最佳浓度比例、Mg^(2+)、dNTPs和甜菜碱浓度及反应条件优化,建立了环介导等温核酸扩增(LAMP)检测方法。结果显示,59℃恒温扩增36min即可出现梯形条带,且产物亦可通过SYBR GreenⅠ染色进行判断。该方法最低检测限为1.0×10~1copies·μL^(-1),与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)及猪圆环病毒1型和2型(PCV1、PCV2)等均无交叉反应。检测68份呼吸道病猪淋巴结样品,PCV3阳性率占30.9%,与PCR检测结果符合率为95.6%(65/68)。相对传统PCR方法而言,该方法敏感特异,简便快速,可用于PCV3检测和临床诊断。

主 题 词：猪圆环病毒3型 RT-LAMP 检测 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.11843/j.issn.0366-6964.2018.06.025

馆 藏 号：203296293...