Dlx2在MC3T3-E1细胞成骨分化过程中的作用

作     者：孙昊 王旭东 沈国芳 蒋欣泉 张秀丽 代杰文 卢境婷 SUN Hao;WANG Xu-dong;SHEN Guo-fang;JIANG Xin-quan;ZHANG Xiu-li;DAI Jie-wen;LU Jing-ting

作者机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院.口腔医学院口腔颌面外科上海市口腔医学重点实验室上海200011 

基　　金：上海市重点学科建设项目(S30206) 上海市科学技术委员会(基础)重点项目(10JC1408700) 上海市申康基金(适宜技术)(SHDC12010205) 上海市卫生局资助项目(2009077) 上海交通大学医工(理)交叉研究基金(YG2010MS55)~~ 

出 版 物：《中国口腔颌面外科杂志》 (China Journal of Oral and Maxillofacial Surgery)

年 卷 期：2011年第9卷第3期

页      码：189-194页

摘      要：目的:探讨Dlx2(distal-less homeobox 2)基因过表达对体外培养的小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1向成骨方向分化的影响。方法:构建Dlx2过表达的反转录病毒载体,测序验证。体外病毒转染MC3T3-E1后,以嘌呤霉素行抗性筛选稳定细胞株,以RT-PCR和Western印迹检测转染后细胞中Dlx2的表达。应用实时定量PCR(RT-PCR)检测Dlx2过表达对部分成骨相关基因(ALP、OCN、Runx2、Msx2)表达的影响。以碱性磷酸酶(ALP)活性测定和茜素红染色法检测Dlx2过表达对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响。采用SAS 6.04软件包对数据进行随机设计的方差分析。结果:本实验成功构建Dlx2过表达的反转录病毒载体,测序正确。体外转染后筛选出Dlx2稳定高表达细胞株MC3T3-E1-Dlx2,其mRNA和蛋白表达量显著高于对照组。在成骨诱导过程中,MC3T3-E1-Dlx2细胞ALP值在第4、7、14d均高于对照组细胞,茜素红染色显示实验组较对照组和空白组染色深。Dlx2过表达在成骨诱导早期能显著促进ALP和Msx2的表达(P0.05)。结论:Dlx2过表达上调ALP、OCN等成骨相关基因的表达,促进MC3T3-E1细胞的成骨分化。

主 题 词：Dlx2基因 成骨分化 MC3T3-E1细胞系 同源盒基因 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100101[100101] 10[医学] 

馆 藏 号：203296600...