基于反转录环介导等温扩增技术检测大肠杆菌O157

作     者：梁玉林 刘秀 周鹏飞 周振森 尹建军 LIANG Yu-lin;LIU Xiu;ZHOU Peng-fei;ZHOU Zhen-sen;YIN Jian-jun

作者机构：中国食品发酵工业研究院北京100015 

出 版 物：《生物技术通报》 (Biotechnology Bulletin)

年 卷 期：2018年第34卷第6期

页      码：59-65页

摘      要：建立反转录环介导等温扩增(Reverse transcriptase loop-mediated isothermal amplification RT-LAMP)方法特异性检测大肠杆菌O157。针对大肠杆菌O157的特异性保守rfb E基因设计多组引物,通过对引物筛选和反应条件优化,建立了检测大肠杆菌O157的实时荧光RT-LAMP方法。利用大肠杆菌O157及其人工污染脱脂乳样品,研究了方法的特异性和灵敏度,并与r RTPCR(Real-time fluorescent quantitative reverse transcription polymerase chain reaction)方法的灵敏度进行比较。结果显示,等温65℃条件下,30 min内能完成RT-LAMP扩增反应。所建立的实时荧光RT-LAMP方法特异性强,除了2株大肠杆菌O157以外其余菌株均未产生特异性扩增反应。同时该方法灵敏度高,对人工污染脱脂乳样品检测灵敏度能达到20 CFU/g,比r RT-PCR方法高10倍。建立的实时荧光RT-LAMP方法将为大肠杆菌O157现场快速检测提供有力手段。

主 题 词：反转录-环介导等温扩增 大肠杆菌O157 检测 脱脂乳 

学科分类：1010[医学-医学技术类] 10[医学] 

D　O　I：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017-0932

馆 藏 号：203297803...