应用TaqMan探针荧光定量PCR技术鉴定Lepr^(db/+)小鼠子代基因型

作     者：赵英政 彭强 闫婷婷 张旭旭 翟晓楠 吴卫东 易宪文 徐光翠 ZHAO Yingzheng;PENG Qiang;YAN Tingting;ZHANG Xuxu;ZHAI Xiaonan;WU Weidong;YI Xianwen;XU Guangcui

作者机构：新乡医学院公共卫生学院河南新乡453003 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(No.81370916 No.81773399) 新乡医学院科研培育基金(No.2014QN110)~~ 

出 版 物：《中国实验动物学报》 (Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica)

年 卷 期：2018年第26卷第2期

页      码：207-210页

摘      要：目的建立一种高效的应用Taq Man探针荧光定量PCR技术对Lepr^(db/+)小鼠子代基因分型的方法。方法提取228例Lepr^(db/+)小鼠子代鼠尾DNA,针对Lepr基因的突变位点(rs1801133)设计1对PCR引物和2条Taq Man探针。设定条件进行实时荧光PCR扩增,用SDS软件对SNP位点进行分型。通过2月龄动物的肥胖表现型验证并进行Hardy-Weinberg平衡检验。结果用建立的Taq Man探针荧光定量PCR方法对228份样本进行检测,其中GG基因型64份,基因型频率为0.1929;GT基因型123份,基因型频率为0.5395;TT基因型41份基因型频率为0.2807。Taq Man探针荧光定量PCR方法分型结果与通过肥胖表现型分型结果比较,灵敏度为97.56%,特异度为99.47%。结论应用Taq Man探针荧光定量PCR技术可实现对Lepr^(db/+)小鼠子代基因位点的早期分型检测,方法简便,高效。

主 题 词：Taqman探针 Leprdb/+小鼠 基因分型 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 071002[071002] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-4847.2018.02.011

馆 藏 号：203298228...