猪流行性腹泻病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

作     者：杨峰 杨猛超 周宏超 许信刚 张为民 张琪 YANG Feng;YANG Meng-chao;ZHOU Hong-chao;XU Xin-gang;ZHANG Wei-min;ZHANG Qi

作者机构：西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100 陕西供销福地牧业有限责任公司陕西周至710400 

基　　金：陕西省农业科技创新与攻关项目(2016NY-095) 西安市农业科技创新计划研发类项目(2017050NC/NY010-2) 杨凌示范区产学研用协同创新重大项目(2017CXY-17) 杨凌示范区农业科技示范推广能力提升项目(TS-2016-12) 

出 版 物：《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期：2018年第39卷第7期

页      码：1-5页

摘      要：为建立一种特异、灵敏、量化、快速的猪流行性腹泻病毒(PEDV)检测方法,设计1对PEDV N基因的特异性引物,建立Eva Green染料的实时荧光定量RT-PCR的检测方法,并对疑似PEDV感染的临床样品进行检测。结果显示,所建立的实时荧光定量RT-PCR方法的标准曲线具有良好的线性关系,线性相关系数R2=0.999;不与猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)发生交叉反应,具有较强的特异性;灵敏度比常规RT-PCR方法高100倍;重复性试验的变异系数均小于5%,重复性良好。对43份临床样品进行检测,结果比普通PCR多检出2份阳性。结果表明,建立的实时荧光定量RT-PCR检测方法在特异性、灵敏度和重复性方面都很好,可用于临床PEDV检测。

主 题 词：猪流行性腹泻病毒 实时荧光定量RT-PCR 检测 

学科分类：090603[090603] 090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-5038.2018.07.001

馆 藏 号：203301344...