RNA干扰Neuropilins-2基因真核表达载体的构建及其鉴定

作     者：周琪 梁后杰 阎晓初 彭秋平 周进明 吴峰 钟大平 边志衡 ZHOU Qi;LIANG Hou-jie;YAN Xiao-chu;PENG Qiu-ping;ZHOU Jin-ming;WU Feng;ZHONG Da-ping;BIAN Zhi-heng

作者机构：第三军医大学西南医院病理科肿瘤科重庆400038 第三军医大学西南医院肿瘤科重庆400038 

基　　金：国家自然科学基金(30572159) 

出 版 物：《第三军医大学学报》 (Journal of Third Military Medical University)

年 卷 期：2007年第29卷第8期

页      码：691-694页

摘      要：目的构建Neuropilins-2(NRP2)基因RNA干扰(RNAi)的真核细胞表达载体。方法以NRP2为靶基因,以pGenSil-l质粒为载体,设计构件重组体,根据GenBank数据库提供的NRP2基因核苷酸序列,按照Tuschl设计原则,选择设计两条带发夹结构的核苷酸序列,克隆到空载体pGenSil-l中,转化DH5α菌株,提取质粒,进行限制性内切酶酶切鉴定和测序分析。重组pGenSil-NRP2载体转染LOVO细胞48 h,收获细胞,采用Western blotting检测其NRP2蛋白表达。结果经酶切鉴定筛选出的重组体测序结果与目的序列完全一致,重组载体构建成功。重组体pGenSil-NRP2转染LOVO细胞48 h后NRP2蛋白表达显著降低。结论利用RNAi技术可成功构建抑制NRP2表达的小干扰RNA重组体。

主 题 词：NRP2 RNA干扰 真核表达载体 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 071010[071010] 081704[081704] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:1000-5404.2007.08.011

馆 藏 号：203301488...