C-erbB2基因siRNA质粒的构建、鉴定及转染

作     者：赵东利 党诚学 隋燕霞 ZHAO Dong-li;DANG Cheng-xue;SUI Yan-xia

作者机构：西安交通大学医学院第一附属医院肿瘤中心放疗科陕西西安710061 西安交通大学医学院第一附属医院病理科陕西西安710061 

出 版 物：《南方医科大学学报》 (Journal of Southern Medical University)

年 卷 期：2009年第29卷第9期

页      码：1870-1873页

摘      要：目的构建人C-erbB2干扰载体pGenesil-erbB2,并稳定转染入CerbB-2高表达的人结肠癌细胞株HT-29细胞,观察其对人结肠癌HT-29细胞从转录后水平对Her-2蛋白表达的影响。方法利用免疫组化方法筛选出CerbB-2高表达细胞株HT-29,以人C-erbB2cDNA基因为靶标设计RNA干扰片段和阴性对照片段,退火形成双链并克隆进入载体pGenesil-erbB,进行鉴定及测序,并稳定转染至HT-29细胞。结果测序证明人C-erbB2siRNA表达载体质粒pGenesil-erbB构建成功,pGenesil-erbB稳定转染入人结肠癌HT-29细胞,采用Westernblot实验证明pGenesil-erbB可显著抑制Her-2蛋白的表达。结论成功构建了人CerbB2干扰载体质粒pGenesil-erbB,稳定转染至结肠癌HT-29细胞株,并能抑制HT-29细胞的Her-2蛋白的表达,为靶向CerbB2的siRNA对结肠癌的放射增敏研究奠定了基础。

主 题 词：载体构建 质粒 RNA干扰 CerbB2 siRNA 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:1673-4254.2009.09.019

馆 藏 号：203302483...