实时荧光定量RT-PCR检测急性白血病中Bmi-1基因mRNA的表达及意义

作     者：于琦 孟秀香 袁宏 王楠 姜艳梅 马末娇 YU Qi;MENG Xiu-xiang;YUAN Hong;WANG Nan;JIANG Yan-mei;MA Mo-jiao

作者机构：大连医科大学检验医学院辽宁大连116044 泰山医学院医学检验系山东泰安271016 大连医科大学附属第一医院检验科辽宁大连116011 中国人民解放军第210医院辽宁大连116013 

出 版 物：《大连医科大学学报》 (Journal of Dalian Medical University)

年 卷 期：2010年第32卷第1期

页      码：90-93页

摘      要：[目的]建立荧光实时定量RT—PCR（FQRT—PCR）检测Bmi—1基因mRNA的方法并研究该基因在急性白血病细胞中表达的意义。[方法]根据Genbank提供的序列，设计目的基因Bmi-1及内参基因GAPDH的扩增引物，将Bmi-1及GAPDHRT—PCR扩增片段克隆入载体pMDl8-Tsimple，经测序鉴定正确后，进行纯化、定量及系列稀释，应用SYBRGreenI荧光染料，建立检测Bmi-1mRNA的FQRT—PCR方法，并对其线性及特异性进行评价。应用此方法检测21例急性白血病及10例健康人外周抗凝血中Bmi-1mRNA的表达水平。【结果]该方法的线性范围为1．0×10^3-1．0×10^8eopies／txL，相关系数为-1．00，熔解曲线分析扩增产物显示单-的峰，熔解温度（Tm）为80．4℃。急性白血病患者的相对表达量为0．56±0．12，健康对照组中Bmi-1mRNA的相对表达量为0．19±0．08，两者的表达差异有统计学意义（P〈0．05）。[结论]实时荧光定量RT—PCR方法检测Bmi-1基因表达，具有高敏感性和高特异性等优点，可作为进-步研究Bmi-1基因的方法。Bmi-1基因参与急性白血病的发生，可能是一种新的肿瘤标志物。

主 题 词：Bmi-1基因 急性白血病 SYBR GreenⅠ 实时荧光定量RT-PCR 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

馆 藏 号：203302582...