SYBR Green荧光定量PCR检测293A细胞UCP2基因表达方法的建立

作     者：张昊 

作者机构：南京大学生命科学学院医药生物技术国家重点实验室江苏南京210093 

出 版 物：《亚太传统医药》 (Asia-Pacific Traditional Medicine)

年 卷 期：2010年第6卷第6期

页      码：6-7页

摘      要：目的:建立验证293A细胞UCP2基因表达情况的SYBR Green荧光定量PCR方法。方法:2μg 293A细胞总RNA用于逆转录,所需的反应体系为20L,其中包含2μg RNA,1mM dNTP,1U/L RNA酶抑制剂,2.5pmol/L Olig(dT)18引物,0.5U/L AMV逆转录酶。PCR最佳反应条件为:95℃5min,95℃30s,60℃60s(40个循环),72℃延伸3min。结果与结论:根据溶解曲线分析,扩增产物中无引物二聚体的影响,说明所设计引物特异,退火温度合适。这表明本研究建立的SYBR Green荧光定量检测方法灵敏度高、定量范围广。

主 题 词：293A UCP2 SYBR Green 荧光定量PCR 

学科分类：1007[医学-药学类] 10[医学] 

馆 藏 号：203302735...