MTH1基因的低表达对HeLa细胞内RNA氧化程度的影响

作     者：戴大鹏 干伟 张立群 聂犇 徐仁爱 蔡剑平 Dai Dapeng;Gan Wei;Zhang Liqun;Nie Ben;Xu Renai;Cai Jianping

作者机构：卫生部北京医院/卫生部北京老年医学研究所卫生部老年医学重点实验室100730 温州医学院药学院药理教研室325035 

基　　金：科技部国际科技合作计划项目(2006DFB31410) 卫生部北京医院面上项目(BJ-2008-77) 

出 版 物：《医学研究杂志》 (Journal of Medical Research)

年 卷 期：2011年第40卷第6期

页      码：35-38页

摘      要：目的建立敲减MTH1基因的HeLa细胞稳定细胞株,研究MTH1基因的低表达对HeLa细胞内RNA氧化程度的影响。方法设计并合成针对MTH1基因的3条siRNA,分别转染HeLa细胞,选择干扰效果最为理想的靶序列连接入反转录病毒载体Retro-Q,在293T细胞内包装病毒颗粒,将病毒转染HeLa细胞后使用嘌呤霉素筛选抗性克隆株,用western b lot技术检测克隆株的MTH1的表达量以确定干扰效果最理想的稳定细胞株,用API5000型质谱仪检测稳定细胞株RNA中的8-oxoG与G的含量以评价RNA的氧化程度。结果本研究设计的3条siRNA中有2条干扰效率可达90%以上,所建立的敲减MTH1基因HeLa细胞稳定细胞株的干扰效果达80%以上,质谱检测结果表明MTH1基因低表达的稳定细胞株每106个G中含有14.9个8-oxoG,而对照细胞中则仅含9.7个8-oxoG。结论 MTH1基因的低表达可引起HeLa细胞中RNA氧化程度明显升高。

主 题 词：8-oxoG RNA干扰 MTH1 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-548X.2011.06.011

馆 藏 号：203303157...