实时荧光定量RT-PCR检测鱼类传染性胰脏坏死病病毒方法的建立

作     者：徐晔 段宏安 周毅 刘亭歧 姚燕林 

作者机构：连云港出入境检验检疫局江苏连云港222042 

基　　金：国家质检总局质检公益项目(2011110037) 国家质检总局科技计划项目(2010IK014) 

出 版 物：《安徽农业科学》 (Journal of Anhui Agricultural Sciences)

年 卷 期：2011年第39卷第31期

页      码：19224-19226页

摘      要：[目的]建立Taqman探针荧光定量RT-PCR检测传染性胰脏坏死病病毒(IPNV)的方法。[方法]选取IPNV病毒的基因保守序列,利用Primer Express 2.0软件设计引物与探针。以梯度稀释的含有IPNV目的扩增片段的质粒作为标准品,探索定量RT-PCR反应条件。[结果]当标准品浓度在102～106 copies/μl之间时,标准品浓度(X)与Ct的关系为Ct=-3.426 lgX+4.481,相关系数R2为0.999 8。该法对病毒性出血性败血症病毒(VHSV)、传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)、鲤春病毒血症病毒(SVC)和流行性造血器官坏死病病毒(EHNV),草鱼呼肠孤病毒(GCRV),大鳞大麻哈鱼胚胎细胞(CHSE-214)和虹鳟的核酸都没有扩增反应。[结论]该检测方法灵敏度高,特异性好,可用于鱼类传染性胰脏坏死病病毒的快速定量检测。

主 题 词：传染性胰脏坏死病病毒(IPNV) 荧光定量RT-PCR Taqman探针 

学科分类：0906[农学-水产类] 09[农学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.0517-6611.2011.31.075

馆 藏 号：203303302...