脯氨酰羟化酶RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定

作     者：马芳芳 王厚照 沈晓丽 Ma Fang-fang;Wang Hou-zhao;Shen Xiao li

作者机构：解放军第174医院检验科福建省厦门市361003 福建省立医院心血管病重点实验室福建省福州市350001 

出 版 物：《中国组织工程研究与临床康复》 (Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research)

年 卷 期：2011年第15卷第41期

页      码：7723-7725页

摘      要：背景:慢病毒载体可稳定介导基因沉默且具有较高的转染效率。目的:构建并鉴定脯氨酰羟化酶RNA干扰慢病毒载体。方法:针对脯氨酰羟化酶2基因序列设计RNA干扰靶序列,合成靶序列的寡聚DNA,退火形成双链DNA,与经AgeⅠ和EcoRⅠ酶切的pGCSIL-GFP连接、转化大肠杆菌感受态细胞,产生重组RNA干扰慢病毒表达载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。结果与结论:PCR和DNA测序证实合成的含脯氨酰羟化酶短发卡RNA慢病毒载体寡核苷酸链正确插入pGCSIL-GFP载体。说明实验成功构建脯氨酰羟化酶基因RNA干扰慢病毒载体。

主 题 词：脯氨酰羟化酶 RNA干扰 慢病毒 缺氧诱导因子1 克隆 

学科分类：0831[工学-公安技术类] 0710[理学-生物科学类] 0403[0403] 1007[医学-药学类] 1002[医学-临床医学类] 08[工学] 1010[医学-医学技术类] 0703[理学-化学类] 0836[0836] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-8225.2011.41.030

馆 藏 号：203303484...