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植原体免疫主导膜蛋白Imp基因在大肠杆菌中表达条件优化

植原体免疫主导膜蛋白Imp基因在大肠杆菌中表达条件优化

作     者:柴化建 赵海泉 张丽君 罗焕亮 

作者机构:深圳市职业技术学院广东深圳518055 安徽农业大学生命科学学院安徽合肥230036 深圳出入境检验检疫局广东深圳518045 

基  金:深圳市科技计划项目(JC200903180710A) 

出 版 物:《安徽农业科学》 (Journal of Anhui Agricultural Sciences)

年 卷 期:2012年第40卷第7期

页      码:3873-3876页

摘      要:[目的]为提高植原体膜蛋白Imp基因在*** BL21(DE3)中的表达量,优化Imp基因的原核表达条件。[方法]通过设计正交试验,考察不同的培养条件对工程菌*** BL21(DE3)-pET-28a(+)-Imp的影响。在获得最佳培养条件的基础上考察不同诱导条件对Imp蛋白表达量的影响。利用SDS-PAGE和Gene Tools凝胶分析软件分析融合蛋白Imp的表达量。[结果]表达条件优化结果表明,最佳培养条件为:温度37℃,pH 7.0,装液量20%,振荡速度200 r/min;最佳诱导条件为:温度37℃,起始OD600≈1.5,IPTG终浓度0.1mmol/L,诱导培养时间6 h。[结论]在最佳条件下Imp表达量达70.98 mg/L,确定了Imp融合蛋白在大肠杆菌的优化表达条件。

主 题 词:植原体 Imp基因 表达条件 正交试验设计 

学科分类:071011[071011] 0710[理学-生物科学类] 07[理学] 

D O I:10.3969/j.issn.0517-6611.2012.07.017

馆 藏 号:203303585...

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