SYBR GreenⅠ实时PCR检测甲型H1N1与季节性流感病毒方法的建立

作     者：李文悌 孙菲 王晓春 LI Wen-ti;SUN Fei;WANG Xiao-chun

作者机构：中南大学湘雅医学院医学检验系长沙410013 湖南国际旅行卫生保健中心长沙410016 

基　　金：湖南省科技厅项目(2011sk3260) 湖南省出入境检验检疫局科技项目(2009hnk001) 长沙市科技局科技项目(K0904150-11) 中南大学研究生学位论文创新基金(2011ssxt253)~~ 

出 版 物：《中国人兽共患病学报》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期：2013年第29卷第1期

页      码：59-63页

摘      要：目的建立一种检测甲型H1N1、季节性H1N1、H3N2与乙型流感病毒的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法。方法设计针对甲型H1N1、季节性H1N1、H3N2与乙型流感病毒HA基因的引物,分别进行SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR反应,同时进行熔解曲线和Tm值分析,并作灵敏度和重复性试验。结果该方法与H5、H7、H9亚型流感病毒及副流感病毒1、2、3型均无交叉反应。构建的荧光定量标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,扩增效率为:95.588%,检测灵敏度为101copies/反应体系,结果重现性好。成功地验证性检验了32份盲样标本。结论本研究建立的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法敏感、不需荧光标记探针、成本低及高通量,能用于人类流感病毒的分型检测。

主 题 词：甲型H1N1 实时荧光定量PCR SYBR GreenⅠ 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2013.01.013

馆 藏 号：203303966...