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炭疽芽孢杆菌A16R株lysA基因缺失突变株的构建

炭疽芽孢杆菌A16R株lysA基因缺失突变株的构建

作     者:高飞 王东澍 冯尔玲 朱力 王恒樑 廖祥儒 刘先凯 GAO Fei;WANG Dong-shu;FENG Er-ling;ZHU Li;WANG Heng-liang;LIAO Xiang-ru;LIU Xian-kai

作者机构:江南大学工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡214122 军事医学科学院生物工程研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京10007 

基  金:国家自然科学基金资助项目(81071322) 国家科技重大专项资助项目(2012ZX10004215) 

出 版 物:《军事医学》 (Military Medical Sciences)

年 卷 期:2013年第37卷第2期

页      码:97-101,113页

摘      要:目的构建炭疽芽孢杆菌(Bacillus anthracis)A16R株lysA基因缺失突变株,为后续的定量蛋白质组学研究奠定基础。方法以炭疽杆菌活疫苗A16R株lysA基因为目的缺失基因,利用软件设计上下游同源臂以及抗性基因的引物,用同源重组酶将3个片段连入质粒中,构建重组质粒,并将重组质粒导入炭疽杆菌A16R感受态细胞中,筛选炭疽杆菌A16R株lysA基因缺失突变株,对其进行验证。最后绘制缺失突变株和野生株生长曲线并进行生理生化分析。结果成功构建了重组质粒,经同源重组后获得lysA基因缺失突变株。鉴定表明目的基因已经丢失。结论成功获得炭疽杆菌A16R株lysA基因缺失突变株,为定量蛋白质组学研究奠定了基础,也为炭疽杆菌重要基因功能的研究建立了良好的技术平台。

主 题 词:炭疽芽孢杆菌A16R株 同源重组 赖氨酸营养缺陷型 

学科分类:1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.7644/j.issn.1674-9960.2013.02.004

馆 藏 号:203304007...

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