禽多杀性巴氏杆菌外膜蛋白H基因的克隆表达及抗原性鉴定

作     者：陈翠腾 程龙飞 刘荣昌 万春和 傅光华 陈珍 朱春华 黄瑜 CHEN Cui teng;CHENG Long fei;LIU Rong chang;WAN Chun he;FU Guang hua;CHEN Zhen ZHU Chun hua;HUANG Yu

作者机构：福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省禽病防治重点实验室/福建省畜禽疫病防控技术重大研发平台福建福州350013 

基　　金：福建省科技计划项目--省属公益类科研院所基本科研专项(2015R1023-9 2016R1022-9 2017R1023-6) 国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-42) 福建省自然科学基金项目(2017J01059 2015J01113) 福建省财政专项(FJFS-2017) 

出 版 物：《福建农业学报》 (Fujian Journal of Agricultural Sciences)

年 卷 期：2018年第33卷第5期

页      码：451-455页

摘      要：为了对禽多杀性巴氏杆菌(Pm)外膜蛋白H(Omp H)的免疫学活性进行鉴定,本研究根据已发表的多杀性巴氏杆菌X-73株(U50907.1)设计了两对引物,用PCR方法扩增了禽多杀性巴氏杆菌CVCC44801株的Omp H,扩增片段为1 348bp(ORF为1 056bp)。扩增的Omp H与GenBank中登录号为AE004439.1(Pm70株)、EF635422.1(C44-1株)、EU016232.1(P52株)、JQ082510.1(XJ121株)、U50907.1(X-73株)、U52200.1(P-1059株)的序列比对分析结果表明,其核苷酸同源性范围在80.2%~98.4%,氨基酸同源性范围在79.6%~98.5%。扩增了去信号肽的Omp H基因,构建原核重组表达质粒pET-Omp H,转化BL21并诱导表达,SDS-PAGE结果表明,表达蛋白约为56ku,与预期分子量的大小相符;蛋白免疫印迹试验结果表明,该蛋白具有良好的免疫学活性,为建立禽Pm血清学检测方法以及禽多杀性巴氏杆菌外膜蛋白疫苗的研究奠定了基础。

主 题 词：禽多杀性巴氏杆菌 外膜蛋白H基因 原核表达 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.19803/j.issn.10080884.2018.05.001

馆 藏 号：203304603...