碱胁迫应答基因GsSnRK1.1与上游调控因子GsGRIK1互作功能分析

作     者：朱延明 杜建英 陈超 于洋 孙晓丽 丁晓东 殷奎德 王子君 朱娉慧 ZHU Yanming;DU Jianying;CHEN Chao;YU Yang;SUN Xiaoli;DING Xiaodong;YIN Kuide;WANG Zijun;ZHU Pinghui

作者机构：东北农业大学植物基因工程实验室哈尔滨150030 黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院黑龙江大庆163319 

基　　金：国家自然科学基金项目(31771692) 黑龙江省高等学校科技创新团队建设计划项目(2011TD055) 

出 版 物：《东北农业大学学报》 (Journal of Northeast Agricultural University)

年 卷 期：2018年第49卷第6期

页      码：1-11页

摘      要：研究针对野生大豆蛋白激酶GsGRIK1与GsSnRK1.1相互作用是否参与植物响应碱胁迫,采用生物信息学、分子生物学以及基因工程等技术手段开展系统研究。首先作碱胁迫应答基因GsSnRK1.1和GsGRIK1全长基因克隆功能验证,证明其有显著耐碱功能;构建酵母表达载体PYX212和PYX242,利用酵母四重突变株(sak1/tos3/elm1/snf1)作表型分析。结果表明,共转化GsSnRK1.1和GsGRIK1的转化子可在非葡萄糖碳源和碱胁迫处理的选择培养基上正常生长。由此证明野生大豆GsSnRK1.1受上游调控因子GsGRIK1激活调控,且发现其可能参与植物耐碱胁迫应答机制。通过Western blot体外生化分析,证明上游调控因子GsGRIK1通过钙离子依赖途径磷酸化激活GsSnRK1.1。利用组织染色法,对GsSnRK1.1和GsGRIK1作碱胁迫下表达模式分析,结果表明,GsSnRK1.1和GsGRIK1基因表达显著响应碱胁迫。通过碱胁迫处理过量表达GsSnRK1.1和GsGRIK1大豆毛状根,作功能表型鉴定,结果表明,共表达GsSnRK1.1和GsGRIK1的大豆毛状根耐碱能力最显著。研究首次阐明GsGRIK1通过钙离子依赖途径磷酸化调控GsSnRK1.1参与碱胁迫应答通路,为完善碱胁迫应答通路奠定重要基础。

主 题 词：野生大豆 碱胁迫 GsSnRK1.1 GsGRIK1 蛋白互作 

学科分类：09[农学] 0903[农学-动物生产类] 0901[农学-植物生产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-9369.2018.06.001

馆 藏 号：203304701...