绵羊肺炎支原体TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

作     者：韩瑞鑫 申捷 申之义 HAN Rui-xin;SHEN Jie;SHEN Zhi-yi

作者机构：内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 内蒙古自治区动物疫病预防控制中心内蒙古呼和浩特010010 

基　　金：国家科技支撑计划资助项目(2015BAI07B02-06) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2018年第48卷第8期

页      码：965-970页

摘      要：本研究旨在建立一种灵敏性高、特异性强的检测绵羊肺炎支原体的TaqMan实时荧光定量PCR方法。根据GenBank上已发表的绵羊肺炎支原体HSP70基因序列设计引物和探针,构建标准阳性质粒,建立实时荧光定量PCR方法。试验结果显示,该方法标准曲线的线性关系良好,标准曲线的相关系数R2=1.000,斜率S=-3.334,扩增效率E=99.5%;敏感性高,可以检测出的最低样品浓度为1×101copies/L,是普通PCR的100倍;特异性强,能有效区分巴氏杆菌等9种病原;重复性好,组内、组间的Ct值变异系数均小于2%。运用本试验建立的实时荧光定量PCR方法可简便、准确地鉴定绵羊肺炎支原体。

主 题 词：绵羊肺炎支原体 HSP70基因 TaqMan实时荧光定量PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2018.0151

馆 藏 号：203304736...