单管可视化环介导等温扩增技术快速检测恶性疟原虫

作     者：江再茂 马雪萍 殷竹君 陆妍 曹晓梅 武海萍 JIANG Zai-mao;MA Xue-ping;YIN Zhu-jun;LU Yan;CAO Xiao-mei;WU Hai-ping

作者机构：中国人民解放军第171医院江西九江332000 南京军区军事医学研究所江苏南京210002 南京军区南京总医院药理科江苏南京210002 江苏省出入境检验检疫局江苏南京210001 

基　　金：国家自然科学基金项目(81373485) 江苏省科技支撑计划-社会发展项目(BE2011607) 

出 版 物：《现代生物医学进展》 (Progress in Modern Biomedicine)

年 卷 期：2014年第14卷第26期

页      码：5014-5018页

摘      要：目的:建立一种基于环介导等温核酸扩增技术(Loop-mediated Isothermal Amplification,LAMP)的恶性疟原虫高灵敏可视化闭管检测方法。方法:针对恶性疟原虫核糖体DNA的序列保守区设计LAMP引物,通过优化LAMP体系中的Mg2+、甜菜碱浓度和反应温度等因素,建立环介导等温扩增法;并结合蜡封反应管对产物进行检测,检测结果可直接通过肉眼观察SYBR Green I荧光显色进行判定。结果:本方法可检测到70个拷贝/管的恶性疟原虫核酸片段,并具有高特异性,可区分检测常见的血液病毒。该法具有如下优点:1、整个反应恒温进行,无需热循环仪;2、闭管检测,极大降低了扩增产物交叉污染的风险;3、检测速度快,整个检测过程只需30 min。结论:该法的建立为恶性疟原虫的现场快速筛检提供了一种简便、高灵敏、高特异的工具。

主 题 词：恶性疟原虫 环介导等温扩增 闭管反应 

学科分类：1010[医学-医学技术类] 10[医学] 

D　O　I：10.13241/j.cnki.pmb.2014.26.004

馆 藏 号：203304784...