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莴苣花叶病毒RT-RPA检测方法的建立

莴苣花叶病毒RT-RPA检测方法的建立

作     者:向均 王垚 文朝慧 张永江 Xiang Jun;Wang Yao;Wen Zhaohui;Zhang Yongjiang

作者机构:中国检验检疫科学研究院北京100176 甘肃出入境检验检疫局 

基  金:"十三五"国家重点研发计划项目(2016YFF0203200) 

出 版 物:《植物检疫》 (Plant Quarantine)

年 卷 期:2018年第32卷第4期

页      码:48-51页

摘      要:根据莴苣花叶病毒(Lettuce mosic virus,LMV)的外壳蛋白保守位点设计引物,并构建片段大小为428 bp的内标质粒,利用引物和内标质粒对可侵染莴苣的5种病毒和与LMV同属的3种病毒进行反转录重组酶聚合酶扩增技术(Recombinase Polymerase Amplification,RPA)检测。结果表明,该方法特异性强,可从阳性样品RNA中扩增出大小为272 bp的目标片段,而其他7种病毒RNA、空白对照以及阴性对照均未扩增出条带;灵敏度高,能检测出稀释100倍的LMV RNA,与常规RT-PCR灵敏度一致;速度快,整个扩增过程只需要40 min,不需要特殊设备。本研究建立的RT-RPA检测方法可应用于LMV的快速检测。

主 题 词:莴苣花叶病毒 重组酶聚合酶扩增技术 检测 

学科分类:09[农学] 0904[农学-动物医学类] 

D O I:10.19662/j.cnki.issn1005-2755.2018.04.008

馆 藏 号:203304784...

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