基于双重PCR技术的鹿茸及其伪品DNA指纹特征和鉴定

作     者：高丽君 何程远 李盈诺 巴宏宇 李梓僮 夏薇 李明成 苑广信 张丽华 艾金霞 GAO Lijun;HE Chengyuan;LI Yingnuo;BA Hongyu;LI Zitong;XIA Wei;LI Mingcheng;YUAN Guanxin;ZHANG Lihua;AI Jinxia

作者机构：北华大学医学检验学院临床血液与体液检验教研室吉林吉林132013 北华大学药学院药物分析教研室吉林吉林132013 吉林雷宁食品药品检测技术服务有限公司吉林吉林132013 

基　　金：吉林省科技厅重点科技成果转化项目资助课题(20160307030YY 20170307001YY) 吉林省科技厅重点科技攻关项目资助课题(20160204004NY) 吉林省发改委产业技术研究与开发项目资助课题(2015Y077) 吉林省教育厅"十二五"科学技术研究项目资助课题(吉教科合字D143) 国家级大学生创新创业训练计划项目资助课题(201711923018) 

出 版 物：《吉林大学学报（医学版）》 (Journal of Jilin University：Medicine Edition)

年 卷 期：2018年第44卷第4期

页      码：839-844页

摘      要：目的:分析鹿茸线粒体细胞色素b(Cytb)和细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因特异性,建立双重PCR技术鉴别鹿茸真伪的分子指纹特征。方法:利用碱变性法提取梅花鹿茸、马鹿茸、驯鹿茸和新西兰鹿茸的基因组DNA,应用引物设计软件Premier 5.0针对Cytb和COⅠ分别设计特异性引物(分别为Cytb 1、2和COⅠ1、2、3),采用单一及双重引物分别进行PCR扩增,筛选特异性强的引物,确定最佳PCR反应条件。结果:采用碱变性法提取的鹿茸基因组DNA片段长度为23 000bp,DNA纯度即A(260)/A(280)为1.80±0.02;应用单一引物进行PCR扩增无法鉴定鹿茸的真伪,而引物Cytb 1和COⅠ1组合后,解链温度为58℃时,梅花鹿茸(吉林、安徽)、马鹿茸均能扩增出395和525bp大小的2个片段,而驯鹿茸和新西兰鹿茸均未能扩增出相应片段;采用该提取方法及最优化的PCR反应条件,对市售样品进行检测,检测结果与实际情况完全一致。结论:双重PCR技术可从分子水平鉴别鹿茸的真伪,该方法特异性高、实用性强,且简便快捷,在鹿茸真伪鉴别方面具有较高的应用价值。

主 题 词：鹿茸 细胞色素b 细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ 双重聚合酶链反应 DNA指纹 

学科分类：1008[医学-中药学类] 0710[理学-生物科学类] 1006[医学-中西医结合类] 071010[071010] 081704[081704] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 100602[100602] 10[医学] 

D　O　I：10.13481/j.1671-587x.20180428

馆 藏 号：203304813...