猪源铁蛋白重链亚基纳米粒的制备

作     者：李滨洲 和春昊 吴秋玲 郭珍珍 张留君 杨国宇 王亚宾 陈丽颖 LI Binzhou;HE Chunhao;WU Qiuling;GUO Zhenzhen;ZHANG Liujun;YANG Guoyu;WANG Yabing;CHEN Liying

作者机构：河南农业大学牧医工程学院河南郑州450002 河南省动物性食品安全重点实验室河南郑州450002 

基　　金：河南省重点科技攻关项目(152102310081) 

出 版 物：《河南农业大学学报》 (Journal of Henan Agricultural University)

年 卷 期：2018年第52卷第3期

页      码：361-365页

摘      要：根据Gen Bank公布的铁蛋白重链基因序列,设计出1对特异性引物;提取猪心脏总RNA,采用RT-PCR方法扩增出铁蛋白重链亚基基因片段,经测序正确后,再将双酶切的纯化产物与PET32a原核表达载体相连接,构建重组质粒、把测序正确的重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3),用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达。将表达的重组蛋白用Ni^+离子亲和层析柱纯化后,用SDS-PAGE和Western blot鉴定纯化的表达产物。将鉴定正确的铁蛋白产物置于透射电镜下观察其表征,以进一步鉴定铁蛋白纳米颗粒是否自组装成功。结果表明,本研究成功表达并纯化出了猪源铁蛋白重链亚基,而透射电镜下观察到了大量直径为10~13 nm的颗粒,说明重组猪源铁蛋白重链纳米粒自组装成功。

主 题 词：猪 铁蛋白 纳米粒 免疫佐剂 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16445/j.cnki.1000-2340.2018.03.009

馆 藏 号：203304999...