重组降血压肽表达系统的构建及表达多肽的鉴定

作     者：王小莉 刘冬 梁世中 WANG Xiao-li;LIU Dong;LIANG Shi-zhong

作者机构：华南理工大学生物科学与工程学院广东广州510006 深圳职业技术学院化生学院广东深圳518055 

基　　金：广东省科技计划工业攻关项目(编号:粤科计字119号) 

出 版 物：《现代食品科技》 (Modern Food Science and Technology)

年 卷 期：2009年第25卷第2期

页      码：129-132,161页

摘      要：通过对降血压肽结构和功能的分析,设计合成了一条小肽VPVLPK。通过测定其对ACE酶的抑制活性,发现此肽具有很好的降血压活性IC50为4.2μmol/L。根据大肠杆菌偏爱密码子人工合成此肽的6拷贝片段,将其克隆至表达载体pET-15b并转化到宿主菌*** BL21(DE3)中。筛选阳性克隆,通过双酶切、PCR及测序表明,本研究已成功构建出重组降血压肽质粒pET-15b-ACEIP的表达系统。IPTG诱导表达后的菌体通过Tricne-SDS-PAGE小分子多肽电泳检测在5.8～7.8kDa之间出现目的蛋白条带,这与理论蛋白分子量6.2kDa相符,且目的蛋白主要存在于超声破碎的上清液中。上清液用胰蛋白酶酶切后,通过HPLC鉴定证实为目的多肽,且多肽的含量达130mg/L。

主 题 词：降血压肽 序列设计 pET-15b-ACEIP 构建 表达 鉴定 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-9078.2009.02.003

馆 藏 号：203309922...