鳙鱼过敏原小清蛋白基因的克隆表达、纯化及免疫学鉴定

作     者：王海燕 李荔 刘志刚 邬玉兰 陈家杰 WANG Haiyan;LI Li;LIU Zhigang;WU Yulan;CHEN Jiajie

作者机构：深圳大学过敏反应与免疫学研究所深圳518060 

基　　金：国家863计划项目资助(No.2006AA100308) 广东省科技重点专项资助(No.2003A3080502) 深港创新圈计划项目(No.200701) 

出 版 物：《卫生研究》 (Journal of Hygiene Research)

年 卷 期：2011年第40卷第5期

页      码：555-558页

摘      要：目的克隆、表达与纯化鳙鱼(Aristichthys nobilis)过敏原小清蛋白,并检测免疫学活性。方法提取鳙鱼的总RNA,设计简并引物,采用RT-PCR方法扩增目的基因,克隆入T载体中进行测序和分析。将目的基因克隆到pET-28a(+)表达载体中于*** BL21(DE3)表达。通过Ni2+亲和层析,对重组蛋白进行纯化,采用免疫印迹(Western-blotting)方法检测其IgE结合活性。结果获得了鳙鱼过敏原小清蛋白基因,该基因被GenBank收录,登陆号FJ013047。基因开放阅读框共330个碱基(包括终止密码子),编码109个氨基酸,相对分子质量为11 537。Western-blotting结果表明,纯化后的重组蛋白能与过敏性患者血清中的特异性IgE结合。结论成功克隆、表达、纯化鳙鱼过敏原小清蛋白,此重组蛋白具有良好的免疫原性。

主 题 词：鳙鱼 小清蛋白 过敏原 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 08[工学] 1010[医学-医学技术类] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.19813/j.cnki.weishengyanjiu.2011.05.002

馆 藏 号：203311396...