缺失耶尔森菌HPI irp6基因EAggEC的构建

作     者：胡静 俞守义 阚飙 刘志华 

作者机构：第一军医大学流行病学教研室广州510515 中国预防医学科学院流行病微生物学研究所 第一军医大学南方医院感染内科 

基　　金：国家重点基础研究发展规划项目资助 (G19990 54 10 1) 

出 版 物：《中国公共卫生》 (Chinese Journal of Public Health)

年 卷 期：2003年第19卷第6期

页      码：641-643页

摘      要：目的　构建小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛irp6重组自杀质粒 ,并应用其构建EAggEC上该基因的缺失株。方法　根据已知小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛irp6基因序列 ,设计PCR引物 ,扩增并克隆了irp6结构基因 ,在体外进行精确突变后 ,插入氯霉素抗性基因。再将含氯霉素的irp6缺失基因亚克隆入自杀质粒 pKNG1 0 1中 ,构建成irp6基因重组自杀质粒 pKH6 ,并以肠粘附聚集性大肠杆菌EAggEC 1 7 2为出发菌株 ,通过体内同源重组 ,置换其irp6基因。结果　经接合转移和同源重组 ,利用蔗糖抗性筛选 ,pKH6上的同源序列有效的置换了EAggEC 1 7 2的irp6基因。结论　以小肠结肠炎耶尔森菌为靶构建的irp6基因重组自杀质粒成功的缺失了EAggEC 1 7 2的irp6基因 ,获得了携带耶尔森菌强毒力岛的EAggEC 1 7 2irp6基因缺失株EAG6 。

主 题 词：毒力岛 强毒力岛 耶尔森菌 自杀质粒 

学科分类：12[管理学] 1204[管理学-公共管理类] 120402[120402] 1004[医学-公共卫生预防医学类] 10[医学] 

D　O　I：10.3321/j.issn:1001-0580.2003.06.007

馆 藏 号：203311996...